龙须菜试剂级R 型藻红蛋白的高效分离纯化方法

	龙须菜试剂级R 型藻红蛋白的高效分离纯化方法
其他名称	Asparagus reagent level R - algae red protein efficient separation and purification method
专利类型	发明
专利号	201310306723X
	刘冰 ; 杜虹 ; 谷洋洋 ; 秦松 ; 陈洁辉
专利权人	中国科学院烟台海岸带研究所 ; 汕头大学
申请日期	2013-07-19
	2017-03-29
专利状态	授权
授权国家	中国
摘要	本发明属于海洋天然活性物质制备技术，具体的说是一种龙须菜试剂级R-型藻红蛋白的高效分离纯化方法。将粉碎的原料大型经济海洋红藻龙须菜加入其10-30体积的PBS缓冲液中浸泡，浸泡后以9000rpm/min-15000rpm/min离心20-30min，收集上清液进行浓缩；浓缩液经硫酸铵进行分级盐析，收集沉淀并用PBS缓冲液溶解，溶解后进行透析24--48小时；所得透析液经强阴离子Source-15Q层析柱纯化，以含NaCl的PBS缓冲液作为洗脱液，流速0.5ml/min, 收集第360min-510min的洗脱液，即为纯度大于5.0的R-型藻红蛋白溶液。采用本发明方法得到的蛋白回收率高，纯化效果好，易于放大，上样量大等特点实现了对藻红蛋白高效分离纯化。
其他摘要	The invention belongs to a preparation technology of marine natural active substances, and concretely relates to an efficient separation and purification method of Gracilaria verrucosa reagent grade R-phycoerythrin. The method comprises the following steps : soaking a crushed raw material marine red alga economic Gracilaria verrucosa into a PBS buffer solution with the volume 10-30 times the crushed raw material, centrifuging under 9000-15000rpm for 20-30min, collecting the obtained supernatant, and concentrating the supernatant; carrying out grading salting-out on the obtained concentrate by ammonium sulfate, collecting the obtained precipitate, dissolving by using the PBS buffer solution, and dialyzing for 24-48h after the dissolution; and carrying out strong anion Source-15Q chromatography column purification on the obtained dialysate, eluting with a PBS buffer solution containing NaCl as an eluent under a flow rate of 0.5ml/min, and collecting 360-510th min eluate to obtain an R-phycoerythrin solution with the purity of above 5.0. The method has the has the characteristics of high recovery rate of the above obtained product, good purification effect, easy amplification, large sample amount, and efficient separation and purification of phycoerythrins.
申请号	201310306723X
公开（公告）号	CN104292316B
IPC 分类号	C07K14/405 ; C07K1/36 ; C07K1/34 ; C07K1/30 ; C07K1/18
专利代理人	周秀梅 ; 李颖
代理机构	沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002
CPC分类号	C07K14/795
文献类型	专利
条目标识符	http://ir.yic.ac.cn/handle/133337/33989
专题	海岸带生物学与生物资源利用重点实验室
作者单位	1.中国科学院烟台海岸带研究所 2.汕头大学
推荐引用方式 GB/T 7714	刘冰,杜虹,谷洋洋,等. 龙须菜试剂级R 型藻红蛋白的高效分离纯化方法. 201310306723X[P]. 2017-03-29.